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蘋果酸脫氫酶—9001-64-3

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中文：蘋果酸脫氫酶

英文：MDH

CAS：9001-64-3

分子式：C9H14N4O3

純度：≥90%

中文同義詞：蘋果酸脫氫酶,蘋果酸脫氫酶;蘋果酸脫氫酶（懸浮液）;

英文同義詞：MDH;Malate Dehydrogenase;

技術(shù)指標(biāo)

外觀: 白色無定型凍干粉末; 蛋白純度: ≥90%; 比活性:≥1000 U/mg 酶粉; 丙酮酸激酶:≤0.5%; 乳酸脫氫酶:≤0.01%; 谷氨酸草酸酯轉(zhuǎn)氨酶: ≤0.01%

酶學(xué)性質(zhì)

來源:微生物, 蘋果酸脫氫酶; 分類EC 1.1.1.37; 分子量 35kDa(SDS-PAGE); 等電點5.61; Km值:7.8×10-5 M(Oxaloacetate); 1.2×10-4 M(NADH); 抑制劑:Hg2+; 最適pH：8.0-9.0; 最適溫度：60℃; pH穩(wěn)定性pH 4.0-9.0(25℃,16 h) 熱穩(wěn)定性:50℃ 以下穩(wěn)定(pH 7.5,30 min); 穩(wěn)定性:-25～-15℃ 靜置保存 12 個月保持90% 以上活性. 用途: 用于谷草轉(zhuǎn)氨酶試劑的研發(fā)和大量制備。

酶活定義: 單位酶活定義為在下述反應(yīng)條件下每分鐘消耗 1μmol NADH 所需的酶量。

試劑準(zhǔn)備

試劑I：100 mM pH 7.5磷酸鉀緩沖液。

試劑II：15 mM草酰乙酸（2.0 mg/mL草酰乙酸，用冷的試劑I溶解）。

試劑III：6.0 mM NADH。

試劑IV：100 mM磷酸鉀緩沖液，pH7.5，含0.2%BSA。

待測樣品：用試劑IV將酶液稀釋至0.05-0.5U/mL。

操作步驟

1.在3 mL比色皿中加入2.8 mL試劑I，0.1mL試劑II，0.1 mL試劑III，30℃預(yù)熱5 min。

2.加入50μL待測樣品，混勻。

3.在340 nm處測定30℃下，1分鐘內(nèi)吸光度的變化率。