產地 | 湖北武漢 |
品牌 | 魏氏試劑 |
貨號 | hbws2022 |
用途 | 用于外貿出口、科學研究和化學試劑等領域? |
包裝規(guī)格 | 1瓶 |
CAS編號 | 9028-56-2 |
純度 | 90% |
是否進口 | 否 |
3α-羥基類固醇脫氫酶—9028-56-2
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中文:3α-羥基類固醇脫氫酶
英文:3α-HSD
CAS:9028-56-2
分子式:E.C.1.1.1.50
純度:≥90%
中文同義詞:3α類固醇脫氫酶,3α羥基類固醇脫氫酶,3ALPHA-羥基類固醇脫氫酶,3a-羥基類固醇脫氫酶,3a-羥類固醇脫氫酶
英文同義詞:3α-HSD,3α-Hydroxysteroid Dehydrogenase,Dehydrogenase, 3a-hydroxy steroid,3alpha-Hydroxy steroid dehydrogenase
技術指標
外觀:白色無定型凍干粉末;蛋白純度:≥90%;比活性:≥25 U/mg酶粉;葡萄糖6磷酸脫氫酶:≤0.01%;乳酸脫氫酶:≤0.005%;谷氨酸脫氫酶:≤0.001%;蘋果酸脫氫酶:≤0.01%;己糖激酶:≤0.01%
酶學性質
來源:微生物;分類:EC 1.1.1.50;分子量:30 kDa(SDS-PAGE);等電點:5.2;Km值:3.6×10-5 M(雄酮),4.7×10-5 M(NAD+);抑制劑:Cu2+,Ag+,Hg2+,Zn2+,F(xiàn)e3+;最適pH:8.5-9.5;
最適溫度:55℃;pH穩(wěn)定性:6.0-9.0(25℃,16 h);熱穩(wěn)定性:37℃以下穩(wěn)定(pH 9.0,30 min);穩(wěn)定性:-25~-15℃靜置保存12個月保持90%以上活性;保護劑:BSA.
用途:用于總膽汁酸(TBA)試劑的研發(fā)和大量制備。
酶活定義:單位酶活定義為在下述條件下,每分鐘催化生成1μmol NADH所需的酶量。
試劑準備
試劑I:0.1 M焦磷酸鈉(用HCl調pH至8.9)。
試劑II:將319 mg NAD+溶解至25 mL雙蒸水中,用固體NaHCO3調節(jié)pH至7.0-7.5,用雙蒸水定容至30 mL。
試劑III:將30mg溶解至100mL甲醇中。
酶稀釋液:10mM Tris-HCl,pH 9.0。
操作步驟
1.向3 mL比色皿中依次加入2.6 mL試劑I,0.2 mL試劑II,0.1 mL試劑III,混勻。
2.將反應混合物在25℃預熱5 min。
3.向反應混合物中加入0.1 mL酶液,混勻,
25℃反應,并用分光光度計在340 nm下,記錄1 min內的吸光度變化(ΔAs)
*用酶稀釋液替代酶液,其它步驟相同,所得溶液吸光度為空白吸光度(ΔAb)ΔA=ΔAs-ΔAb