產(chǎn)地 | 湖北武漢 |
品牌 | 魏氏試劑 |
貨號 | hbws2022 |
用途 | 用于外貿(mào)出口、科學研究和化學試劑等領(lǐng)域? |
包裝規(guī)格 | 1瓶 |
CAS編號 | 9030-66-4 |
純度 | 90%% |
是否進口 | 否 |
甘油激酶—9030-66-4
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中文:甘油激酶
英文:GK
CAS:9030-66-4
分子式:C3H8O3
純度:≥90%
貨期:24h
貨號:HH1205-01
規(guī)格:5ku
中文同義詞:甘油激酶; 甘油激酶GK;
英文同義詞:GK; GLK; HK4; HHF3;
技術(shù)指標
外觀:白色或淡黃色無定型凍干粉末蛋白純度:≥90%; 比活性:≥15 U/mg 酶粉; 過氧化氫酶:≤0.001%; 尿酸酶:≤0.01%; 己糖激酶:≤0.01%; ATP 酶:≤0.005%
酶學性質(zhì)
來源:微生物; 分類:EC 2.7.1.30; 分子量:55 kDa(SDS-PAGE); 等電點:5.0; Km值:4.4×10-5 M(Glycerol), 3.7×10-5
M(ATP); 抑制劑:Ag+,Hg2+; 最適:pH 7.5
用途:科研試劑 外貿(mào)出口
酶活定義:單位酶活定義為在下述條件下,每分鐘消耗1μmol甘油所需的酶量。
試劑準備
試劑I:0.3 M 甘油(稱取0.552 g 甘油用純水定容到20 mL)。
試劑II:純水配制1 kU/mL POD。
試劑III:50 mM TOOS(1.477 g TOOS 溶于 100 mL UP水)。
試劑IV:50 mM 4-AA(1.016 g 4-AA溶于 100 mL UP 水)。
試劑V:20 U/mL甘油-3-磷酸氧化酶。
試劑VI:200 mM HEPES,含 20 mM MgCl2 和 40 mM ATP(0.953 g HEPES,0.076 gMgCl2,0.44 g ATP,用10 mL 水溶解,用 NaOH 調(diào)節(jié) pH 至 7.9,定容到 20 mL)。
按如下配制反應(yīng)混合物:
試劑VI:10 mL; 試劑I: 1.67 mL; 試劑II: 400μL; 試劑III: 3 mL; 試劑IV: 3 mL; 試劑V: 40 mL; 雙蒸水定容至 100 mL
酶稀釋液:20 mM, pH 7.5 磷酸鉀緩沖液。樣品:用酶稀釋液將酶稀釋至 0.2-0.4 U/mL。
操作步驟
1. 在 1 mL 比色皿中加入 1.0 mL 反應(yīng)混合物。
2. 37℃溫浴2 min。
3. 加入0.02 mL待測樣品,混勻。
4. 用分光光度計在555 nm測定樣品1 min內(nèi)的吸光度變化 ΔAs。
*用 酶稀釋液替代酶液,其它步驟相同,所得溶液吸光度為空白吸光度 ΔAb。ΔA=ΔAs-ΔAb